ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線制作詳細(xì)步驟與質(zhì)控要點(diǎn)

    一、標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備與梯度稀釋

    復(fù)溶與稀釋?：凍干標(biāo)準(zhǔn)品需用試劑盒提供的稀釋液復(fù)溶，按說(shuō)明書稀釋為梯度濃度（如0.312-20ng/mL），覆蓋待測(cè)樣本預(yù)期范圍?。

    加樣精度?：使用校準(zhǔn)后的移液器，每個(gè)濃度設(shè)置2-3個(gè)復(fù)孔，避免氣泡或殘留，確保體積誤差≤5%?。

    二、同步檢測(cè)與OD值讀取

    操作規(guī)范?：標(biāo)準(zhǔn)品與待測(cè)樣本需在同一酶標(biāo)板中同步檢測(cè)，避免孵育時(shí)間差異?。

    試劑狀態(tài)?：確保試劑盒在有效期內(nèi)，HRP標(biāo)記抗體無(wú)沉淀或失活?。

    三、數(shù)據(jù)擬合與曲線繪制

    模型選擇?：

    線性擬合（窄濃度范圍，R2≥0.99）?。

    四參數(shù)Logistic（S型曲線，R2≥0.99）?。

    軟件工具?：推薦GraphPadPrism或ELISACalc，自動(dòng)生成曲線并計(jì)算樣本濃度?。

    四、質(zhì)控參數(shù)驗(yàn)證

    加標(biāo)回收率?：

    公式：回收率=(測(cè)定回收樣本濃度均值-基礎(chǔ)樣本濃度均值)/加入濃度×100%?。

    合格標(biāo)準(zhǔn)：80%-120%（高、中、低濃度平均值）?。

    稀釋線性?：樣本稀釋后OD值應(yīng)與理論值呈線性（R2≥0.99）?。

    精密度控制?：

    板內(nèi)差（CV<5%）、板間差（CV<8%）?。

    空白孔OD值應(yīng)<0.1，否則排查背景干擾?。

    五、常見(jiàn)問(wèn)題與解決

    曲線異常?：若R2<0.98，檢查標(biāo)準(zhǔn)品稀釋誤差或試劑失效?。

    樣本超范圍?：稀釋后重新檢測(cè)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)?。

    注：以上僅供參考！

    標(biāo)簽：elisa試劑盒天津本生本生試劑盒

    ELISA試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承：遵紀(jì)守法，嚴(yán)于律己，寬仁以待，敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn)，以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng)，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作，共創(chuàng)美好的未來(lái)。